Вопросы медицинской химии (ISSN 0042-8809)

Времяразрешённый иммунофлуоресцентный анализ на ДНК и исследование содержания ДНК в сыворотке человека

   


1. Институт биоорганической химии Сибирского отделения РАН
Идентификатор PubMed: 11693032
Год: 2001 том: 47  выпуск:4  страницы: 439-448
Реферат: О внеклеточной ДНК крови известно, что она присутствует в очень низких концентрациях и её уровень способен значительно повышаться при некоторых злокачественных опухолях, системной красной волчанке и радиационном поражении. Нашей задачей была разработка количественного метода анализа для исследования уровня ДНК в сыворотке крови человека в норме и при патологии. Для этого были разработаны подходы к индукции антител класса G к нативной ДНК млекопитающих. Успешной оказалась иммунизация кроликов комплексом метилированного БСА с ДНК и в результате у одного из шести животных была получена антисыворотка против нативной ДНК млекопитающих (содержащая помимо иммуноглобулинов класса М антитела класса G). На основе анти-ДНК антител класса G был разработан времяразрешённый иммунофлуоресцентный сэндвич-анализ на ДНК. Чувствительность метода составляет 8 пкг/мл, а рабочий диапазон от 10 пкг до 1000 000 пкг/мл. При помощи времяразрешённого сэндвич-анализа были исследованы образцы сывороток здоровых доноров, больных вирусными гепатитами и аутоиммунным тиреоидитом. Концентрация ДНК в сыворотке здоровых доноров составляет 0,62 ± 0,49 нг/мл (среднее ± среднеквадратическое отклонение). У 19 больных вирусным гепатитом (В или С) и 14 пациентов с аутоиммунным тиреоидитом сывороточная концентрация ДНК значительно повышена и составляет соответственно 2,3 ± 6,6 и 105 ± 175 нг/мл. Высокий уровень внеклеточной ДНК в крови может являться одной из причин индукции ДНК-гидролизующих антител, которые часто встречаются при этих заболеваниях. Поскольку представленный сэндвич-метод способен определять следовые количества ДНК на фоне высоких концентраций белка в сыворотке крови, он может быть также рекомендован для анализа и других биологических жидкостей
Загрузить PDF:
Ссылка: Шевчук Н.А., Времяразрешённый иммунофлуоресцентный анализ на ДНК и исследование содержания ДНК в сыворотке человека, Вопросы медицинской химии, 2001, том: 47(4), 439-448.
Список литературы
 2002(Том:48)
 2001(Том:47)
 2000(Том:46)
 1999(Том:45)
 1998(Том:44)
 1997(Том:43)
 1996(Том:42)