Вопросы медицинской химии (ISSN 0042-8809)

Исследование тканевого и субклеточного распределения изатин-связывающих белков при помощи оптического биосенсора

   


1. НИИ биомедицинской химии им. В.Н.Ореховича РАМН
Идентификатор PubMed: 12068500
Год: 2002 том: 48  выпуск:1  страницы: 73-83
Реферат: Предложен метод интегративной оценки тканевого и субклеточного распределения изатин-связывающих белков. Принцип метода основан на мониторинге изменения оптических характеристик поверхности биосенсора при образовании комплексов между растворимым белком и иммобилизованным лигандом - изатином. Важным условием применения этого метода является возможность солюбилизации исследуемых субклеточных фракций детергентом (1% раствор тритона Х-100). В качестве иммобилизованного лиганда использован 5-аминоизатин. Иммобилизацию осуществляли за счет образования пептидной связи между аминогруппой этого аналога изатина и активированной карбоксильной группой декстрановой подложки ячейки биосенсора. В митохондриях печени изатин-связывающие белки сосредоточены преимущественно во фракции внешних мембраны. Обработка митохондрий ацетиленовыми ингибиторами хлоргилином и депренилом в концентрации (1 мкМ), преимущественно тормозящей активность МАО А и МАО Б, соответственно, приводила к существенному уменьшению интенсивности сигнала и изменению формы кинетической кривой. Эти результаты согласуются с представлениями о том, что в митохондриях именно МАО является основной мишенью действия изатина. Добавление обработанных раствором тритона Х-100 препаратов мембранной и растворимой фракций мозга, печени, сердца и почек в кювету также приводило к появлению характерного ответа, свидетельствующего о связывании белков иммобилизованным 5-аминоизатином. В мозге, печени и сердце связывание преобладало в случае мембранных фракций, в то время как в почках связывание с изатином былом выше в растворимой фракции.
Загрузить PDF:
Ссылка: Иванов Ю.Д., Панова Н.Г., Гнеденко О.В., Бунеева О.А., Медведев А.Е., Арчаков А.И., Исследование тканевого и субклеточного распределения изатин-связывающих белков при помощи оптического биосенсора, Вопросы медицинской химии, 2002, том: 48(1), 73-83.
Список литературы
 2002(Том:48)
 2001(Том:47)
 2000(Том:46)
 1999(Том:45)
 1998(Том:44)
 1997(Том:43)
 1996(Том:42)