Использование метода лантанидного флуоресцентного иммуноанализа для определения гормона тироксина в сухих пятнах крови

   


1. Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
2. Институт молекулярной биологии им. В. А Энгельгардта, РАН
Тип: Экспериментальное/клиническое исследование
Идентификатор PubMed: 14569875
Год: 2003 том: 49  выпуск:1  страницы: 70-79
Реферат: Определение гормона тироксина (Т4) является подтверждающим тестом на врожденный гипотиреоз, который в 70% случаев протекает бессимптомно. Нами разработан метод иммунофлуоресцентного анализа тироксина для неонатального скрининга с использованием моноклональных антител и тироксина, меченного европием, в сухих пятнах крови для флуоресцентного иммуноанализа с временным разрешением (ФИАВР) с использованием импульсного спектрофлуорометра DELFIA Plate Fluorometer 1232 ("Wallac", Финляндия) и его последующих модификаций, которыми оборудованы региональные центры неонатального скрининга. Получены, охарактеризованы и стандартизированы препараты моноклональных антител: определены классы/подклассы иммуноглобулинов (IgG 2b, IgG 1), константы связывания (107 - 108 М-1), перекрестная реактивность с агентами, гомологичными по структуре с Т4 (0-2% перекреста). Отобраны наиболее устойчивые клоны с константой аффинности 108 М-1, позволяющие детектировать уровень концентрации общего тироксина в крови. Синтезированы конъюгаты хелата европия с тироксином. Оптимизирован состав буфера для анализа Т4, который включает салицилат натрия в концентрации 2 мг/мл и этилендиаминтетрауксусную кислоту в концентрации 2 мМ. Предел детекции тироксина в сухих пятнах крови составляет 10 нМ, при коэффициенте вариации не более 15 %, что позволяет диагностировать сниженный уровень общего тироксина. Точность анализа тироксина оценена с помощью набора сывороток для межлабораторного контроля качества Lipochek Immunoassay Plus Control KitTM ("BioRad", США). Полученные значения укладываются в доверительный интервал концентраций Т4, указанный для сывороток, что говорит о надежности разработанного метода.
Загрузить PDF:
Ссылка: Жердева В.В., Чудинов А.В., Савицкий А.П., Использование метода лантанидного флуоресцентного иммуноанализа для определения гормона тироксина в сухих пятнах крови, Биомедицинская химия, 2003, том: 49(1), 70-79.
Список цитируемой литературы (Bibliography)
 2016(Том:62)
 2015(Том:61)
 2014(Том:60)
 2013(Том:59)
 2012(Том:58)
 2011(Том:57)
 2010(Том:56)
 2009(Том:55)
 2008(Том:54)
 2007(Том:53)
 2006(Том:52)
 2005(Том:51)
 2004(Том:50)
 2003(Том:49)