Эффективный метод очистки ДНК из загрязненных объектов и оптимизация амплификации

   


1. Государственное учреждение Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича, РАМН
Тип: Краткое сообщение
Идентификатор PubMed: 15179830
Год: 2004 том: 50  выпуск:2  страницы: 211-216
Реферат: Предложен способ выделения и очистки ДНК из сильнозагрязненных предметов-носителей. Он включает: 1) стандартную обработку биоматериала протеиназой К с последующей фенол-хлороформной экстракцией; 2) освобождение от катионов на смоле дауэкс-50W и низкомолекулярных примесей гель фильтрацией на сефадексе G-50. Синтезированы модифицированные олигонуклеотидные праймеры и оптимизированы условия амплификации для двух variable namber of tandem repeats (VNTR) локусов аполипопротеин В (ароВ) и D17S5, широко применяющихся при ДНК-типировании человека с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР). Повышение стабильности и специфичности амплификации VNTR локусов ароВ и D17S5 достигнуто благодаря оптимизации длины и состава праймеров и изменения режима амплификации. Чувствительность предложенного способа амплификации составляет 2-4 нг ДНК-матрицы. Использование условий "гнездовой" амплификации для локуса ароВ позволило добиться повышения чувствительности метода до нескольких копий ДНК мишени.
Загрузить PDF:
Ссылка: Федченко В.И., Гурьев С.О., Калошин А.А., Эффективный метод очистки ДНК из загрязненных объектов и оптимизация амплификации, Биомедицинская химия, 2004, том: 50(2), 211-216.
Список цитируемой литературы (Bibliography)
 2016(Том:62)
 2015(Том:61)
 2014(Том:60)
 2013(Том:59)
 2012(Том:58)
 2011(Том:57)
 2010(Том:56)
 2009(Том:55)
 2008(Том:54)
 2007(Том:53)
 2006(Том:52)
 2005(Том:51)
 2004(Том:50)
 2003(Том:49)