Реферат: В последние годы всё большее распространение получают пренатальные методы диагностики генетических заболеваний. В классической акушерской практике при диагностике многих генетических заболеваний применяется метод биопсии ворсинок хориона или пункции околоплодной жидкости с последующим её исследованием. Одним из самых эффективных инструментов неинвазивной пренатальной диагностики оказалась полимеразная цепная реакция (ПЦР). В отличие от УЗИ-обследования ПЦР абсолютно безопасна для эмбриона и гораздо более чувствительна на ранних сроках беременности. ПЦР дала возможность выявлять мужскую ДНК плода в кровотоке матери и определять некоторые сцепленные с полом генетические заболевания. В настоящей работе мы попытались на примере определения Y-хромосомы в материнской периферической крови сравнить эффективность выявления различных маркерных участков Y-хромосомы в зависимости от сроков беременности, типа компонента крови (цельная кровь, плазма или сыворотка) и разновидности ПЦР-метода (одиночная ПЦР или гнездовая (nested)-ПЦР).
На основании сравнительного анализа последовательностей ДНК с использованием интернет-портала NCBI Blast были установлены уникальные области Y-хромосомы (локусы DYS14 и ZFY), оказавшиеся пригодными для ПЦР-идентификации мужской ДНК. Было выяснено, что наиболее предпочтительным компонентом крови для пренатальной ПЦР-идентификации является плазма. Установлен минимальный срок пренатальной идентификации пола плода по крови беременной женщины - 4-6 недельная беременность.
6. Lo Y.M.D., Patel P., Baigent C.N., Gillmer M.D., Chamberlain P., Travi M., Sampietro M., Wainscoat J.S. (1993) Hum. Genet., 90(5) , 483-488. Scholar google search
7. Rodriguez De Alba M., Palomino P., Jurado A., Sanz R., Ibanez M.A., Fernandez-Moya J.M. (1999) Prenat. Diagn., 19(10) , 934-940 Scholar google search
8. Massari A., Novelli G., Colosimo A., Sangiuolo F., Palka G., Calabrese G., Camurri L., Ghirardini G., Milani G., Giorlandino C., Gazzanelli G., Malatesta M., Romanini C., Dallapiccola B. (1996) Hum. Genet., 97(2) , 150-155 Scholar google search
9. Lo Y.M., Corbetta N., Chamberlain P.F., Rai V., Sargent I.L., Redman C.W., et. аl. (1997) Lancet, 350, 485–4877 Scholar google search
10. Lo Y.M.D., Tein M.S.C., Lau T.K., Haines C.J., Leung T.N., Poon P.M.K., et. al. (1998) Am. J. Hum. Genet., 62, 768-775 Scholar google search
11. Smid M., Lagona F., de Benassuti L., Ferrari A., Ferrari M., Cremonesi L. (1999) Clin. Chem., 45, 1570-1572. Scholar google search
19. Maniatis T., Fritach E.F. and Sambrook(1993) J. Molecular Cloning. ALaboratory Manual. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY. Scholar google search
20. Walsh P.S., Metzger D.A., Higuchi R. (1991) BioTechniques 10, 506-513. Scholar google search
22. Boom R., Sol C.J., Salimans M.M., Jansen C.L., Wertheim-van Dillen P.M., van der Noordaa J. (1990) J. Clin. Microbiol., 28, 495-503. Scholar google search
23. Lau Y.F., Chan K.M. (1989) An. J. Hum. Genet., 45(6) , 942-952 Scholar google search
24. Федченко В.И., Гурьев С.О., Калошин А.А. (2004) Биомедицинская химия, 50(2) 211-216. Scholar google search
25. Zhao X.X., Suzumori N., Ozaki Y., Sato T., Suzumori K. (2004) Gynecol. ObstetInvest. 58(1) , 57-60. Scholar google search
26. Ayuso C., Diaz-Recasens J., Lahoz C., Ramos C. (1999) Prenat. Diagn., 19 (10) , 934-940 Scholar google search
27. Kao S.M., Tang G.C., Hsieh T.T., Young K.C., Wang H.C., Pao C.C. (1992) Am. J. Obstet Gynecol., 166 (3) , 1013-1019. Scholar google search
28. Yatama M.K., Mustafa A.S., Ali S., Abraham S., Khan Z., Khaja N. (2001) PrenatDiagn., 21(5) , 399-402. Scholar google search
