Идентификация цитохромов P450 микросом клеток печени человека с помощью масс-спектрометрии

   


1. ГУ НИИ биомедицинской химии РАМН
2. Российский научный центр хирургии РАМН
Тип: Экспериментальное/клиническое исследование
УДК: 577.151.53 + 577.151.54 + 577.112      Идентификатор PubMed: 18035721
Год: 2007 том: 53  выпуск:4  страницы: 400-411
Реферат: Для выявления и идентификации форм цитохрома Р450 высокоочищенных мембран микросом печени человека были использованы методы протеомного анализа, которые включали разделение белков с помощью одномерного и двумерного электрофореза (1D и 2D) и молекулярное сканирование методом масс-спектрометрии участка геля в диапазоне 45-66 кДа (область, соответствующая молекулярной массе цитохромов Р450). Анализ содержания белков проводили по оригинальной технологии 1D-ZOOMER, которая позволяла осуществлять обработку массива масс-спектров, а не единичных масс-спектров, как принято в стандартных методиках. В области 45-66 кДа было идентифицировано 13 микросомальных мембранных белков, в том числе такие формы цитохрома Р450, как 1А2, 1В1, 2А6, 2Е1, 2C8, 2С9, 2С10, 2D6, 3А4, 4A11, 4F2. Исследование ферментной активности цитохромов Р450 семейств 1А, 2В, 2С, 3А и 2Е в микросомах клеток печени человека выявило снижение скоростей О-деалкилирования и N-деметилирования цитохромов Р450 1А1/1А2 и 3А4 при патологии, в то время как активности 7-бензоксирезоруфин-О-дебензилазы (характеризует суммарную активность CYP2B и CYP2C), цитохрома Р450 2Е1 (окисление метанола), 7-пентоксирезоруфин-О-деалкилазы (CYP 2B), 7-этокси- и 7-метоксикумарин-О-деалкилаз (CYP 2B1) практически не изменялись. На основании полученных результатов показана эффективность использования комбинации протеомного и биохимического анализов для инвентаризации цитохромов Р450 и выявления уровня их экспрессии, обсуждаются возможности масс-спектрометрии для количественной оценки белков.
Загрузить PDF:
Ссылка: Петушкова Н.А., Лисица А.В., Карузина И.И., Згода В.Г., Шереметьева Г.Ф., Саменкова Н.Ф., Никитин И.П., Сахарова Т.А., Копылов А.Т., Арчаков А.И., Идентификация цитохромов P450 микросом клеток печени человека с помощью масс-спектрометрии, Биомедицинская химия, 2007, том: 53(4), 400-411.
Список цитируемой литературы (Bibliography)
 2016(Том:62)
 2015(Том:61)
 2014(Том:60)
 2013(Том:59)
 2012(Том:58)
 2011(Том:57)
 2010(Том:56)
 2009(Том:55)
 2008(Том:54)
 2007(Том:53)
 2006(Том:52)
 2005(Том:51)
 2004(Том:50)
 2003(Том:49)