Оптико-биосенсорный анализ взаимодействий редокс-партнеров цитохром P450 2в4 - содержащей монооксигеназной системы в условиях гидроксилирования

   


1. Институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича РАМН
Тип: Экспериментальное/клиническое исследование
УДК: 577.152.3      Идентификатор PubMed: 18988459
Год: 2008 том: 54  выпуск:4  страницы: 435-444
Реферат: Взаимодействия между цитохром Р450 2В4 (d-2B4), NADPH-цитохром Р450 редуктазой (d-Fp) и цитохромом b5 (d-b5) в мономерной реконструированной Р450 2В4-содержащей монооксигеназной системе были исследованы с помощью оптического биосенсора в присутствии NADPH и 7-пентоксирезоруфина (т.е. в гидроксилирующих условиях). Для этого каждый из партнеров был иммобилизован по аминогруппам на карбоксиметилдекстрановую поверхность биочипа оптического биосенсора IAsys+. Такая иммобилизация белков не приводила к потере их активности в биочипе. Зарегистрировано формирование бинарных d-Fp/d-2B4 комплексов. Константы скоростей ассоциации/диссоциации реакции комплексообразования составляли (kon /koff)=(0,013±0,005)·106·M-1·с-1/ 0,05±0,02 с-1, а константа диссоциации KD = (0,26±0,13)·10-6 M. Сравнение kon, koff и KD для d-Fp/d-2B4 комплексов, формирующихся в условиях гидроксилирования (О-деалкилирования), с соответствующими константами для окисленных форм белков - (0,10±0,03)·106·M-1·с-1/ (0,14±0,06) с-1, (0,71±0,37)·10-6 M - показывает снижение kon и в незначительной степени КD за счёт увеличения времени жизни комплексов при переходе от окисленного состояния к условиям гидроксилирования. Формирование комплексов между d-Fp и d-b5 не было зарегистрировано как в условиях гидроксилирования, так и для окисленных форм белков. В обоих случаях показано формирование тройных комплексов d-Fp/d-2B4/d-b5.
Загрузить PDF:
Ссылка: Иванов Ю.Д., Иванов А.В., Петушкова Н.А., Гара О.Г., Кузнецов В.Ю., Подоплелов А.В., Арчаков А.И., Оптико-биосенсорный анализ взаимодействий редокс-партнеров цитохром P450 2в4 - содержащей монооксигеназной системы в условиях гидроксилирования, Биомедицинская химия, 2008, том: 54(4), 435-444.
Переводная версия в журнале
«Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:
10.1134/S1990750808040069
Список цитируемой литературы (Bibliography)
 2016(Том:62)
 2015(Том:61)
 2014(Том:60)
 2013(Том:59)
 2012(Том:58)
 2011(Том:57)
 2010(Том:56)
 2009(Том:55)
 2008(Том:54)
 2007(Том:53)
 2006(Том:52)
 2005(Том:51)
 2004(Том:50)
 2003(Том:49)