Разработка нового вектора для получения полноразмерных библиотек кДНК

   


1. Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича, РАМН
Тип: Экспериментальное/клиническое исследование
DOI: 10.18097/pbmc20105603329      УДК: 577.21      Идентификатор PubMed: 20695212
Год: 2010 том: 56  выпуск:3  страницы: 329-341
Реферат: Сконструирован оригинальный вектор pEM-(dT)40f(+), который может быть использован для получения полноразмерных кДНК с полиаденилированных мРНК, выделенных из различных источников. Вектор pGEM-(dT)40f(+) переводится в одноцепочечную, а затем в линейную форму, содержит на 3'-конце гомополимерный остаток (dТ)40 и служит вектором-праймером (ВП) для синтеза первой цепи кДНК. Использование синтетического олигонуклеотида, комплементарного к вектору и рекомбинантной ДНК, приводит к кольцеванию вектора и синтезу второй цепи ДНК. Такой подход имеет ряд преимуществ: (1) получение кДНК библиотек упрощено и состоит из трёх этапов; (2) получение полноразмерных кДНК молекул достигается вследствие добавления на 5'-конец гомополимера (dС)n; (3) для получения библиотеки клонов требуется несколько микрограмм тотальной РНК; (4) можно получать клоны кДНК до 10 г.п.о; (5) для получения кДНК не используется ПСР-реакция, которая часто вызывает артефактные мутации в кДНК последовательности; (6) не образуются химерные продукты кДНК и не используется обработка рестриктазами.
Загрузить PDF:
Ссылка: Федченко В.И., Калошин А.А., Медведев А.Е., Разработка нового вектора для получения полноразмерных библиотек кДНК, Биомедицинская химия, 2010, том: 56(3), 329-341.
Переводная версия в журнале
«Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:
10.1134/S1990750810040050
Список цитируемой литературы (Bibliography)
 2016(Том:62)
 2015(Том:61)
 2014(Том:60)
 2013(Том:59)
 2012(Том:58)
 2011(Том:57)
 2010(Том:56)
 2009(Том:55)
 2008(Том:54)
 2007(Том:53)
 2006(Том:52)
 2005(Том:51)
 2004(Том:50)
 2003(Том:49)