Турбидиметрический метод регистрации формирования фибринового сгустка под действием экзогенного тромбина позволяет количественно оценить два этапа этого процесса: образования протофибрилл и их латеральной агрегации. Начальная фаза оценивается временем, в течение которого не происходит изменений оптических свойств инкубационной среды. Вторая фаза наступает по достижении достаточного уровня протофибрилл и сопровождается нарастанием оптической плотности среды. Использовали пул цитратной плазмы здоровых доноров. Процесс гемокоагуляции инициировали добавлением бычьего тромбина в присутствии ионов Са2+. Изучены изменения турбидиметрических параметров этой системы под воздействием гепарина, экстракта Laminaria digitata и препарата коллагеназы из Cl. histolyticum. экстракт ламинарии содержит сильный антикоагулянт, действующий подобно гепарину. Противосвертывающий эффект развивается вне зависимости от времени прединкубации с плазмой. Оба агента замедляли процесс образования и накопления протофибрилл, т.е. проявляли себя как ингибиторы тромбина. Однако кинетические характеристики выявленного эффекта различались: время накопления критической массы протофибрилл росло пропорционально количеству экстракта ламинарии, а в опытах с гепарином этот прирост был гораздо значительнее степени увеличения концентрации антикоагулянта. Преинкубация плазмы крови с коллагеназой приводит к изменению только второй фазы турбидиметрической кривой – снижается скорость латеральной агрегации. Степень снижения находилась в линейной зависимости от концентрации коллагеназы. Это означает, что фибриноген является субстратом коллагеназы, однако его расщепление происходит вне области, атакуемой тромбином, поскольку темп накопления протофибрилл оставался неизменным. Полученные результаты свидетельствуют о новых возможностях, которые открывает турбидиметрический метод в изучении механизмов действия эффекторов на гемокоагуляцию в условиях, близких к физиологическим.
Загрузить PDF:
Цитирование:
Щербак И.Г., Субботина Т.Ф., Фаенкова В.П., Рюмина Е.В. (2001) Турбидиметрический анализ полимеризации фибрина в плазме крови. Вопросы медицинской химии, 47(1), 80-90.
Щербак И.Г. и др. Турбидиметрический анализ полимеризации фибрина в плазме крови // Вопросы медицинской химии. - 2001. - Т. 47. -N 1. - С. 80-90.
Щербак И.Г. и др., "Турбидиметрический анализ полимеризации фибрина в плазме крови." Вопросы медицинской химии 47.1 (2001): 80-90.
Щербак, И. Г., Субботина, Т. Ф., Фаенкова, В. П., Рюмина, Е. В. (2001). Турбидиметрический анализ полимеризации фибрина в плазме крови. Вопросы медицинской химии, 47(1), 80-90.
Список литературы
Sato H., Nakajima A. (1984) Thrombosis Research, 33, 645 - 651. Scholar google search
Carlson R.H., Garwck R.L., Jones A.J.S. (1988) Anal Biochem , 168, 428- 435. Scholar google search