Роль отдельных аминокислотных остатков иммунодоминантного непрерывного эпитопа цитохрома P450cam (CYP101) 312KKGDQ317 в распознавании специфическими антителами
Ранее было показано, что участок бактериального цитохрома PcamCYP101) 311-318 содержит иммунодоминантный непрерывный B-эпитоп. Для выявления роли отдельных аминокислотных остатков в связывании антител посредством пиновой технологии (Multipin™) синтезированы аналоги антигенного гексапептида 312LKKGDQ317 с единичными аминокислотными заменами в каждой позиции. Антитела из трех поликлональных кроличьих антисывороток против P450cam характеризовались сходным взаимодействием с синтезированными пептидами. Показана важная роль остатка G315, любая замена которого приводит к падению связывания специфических антител до фоновых величин. Замены на другие аминокислотные остатки в позициях L312,K313 и D316 влияли на взаимодействие с антителами по разному; лишь некоторые замены были возможны без ущерба для связывания. Остатки K314 и Q317 оказались наименее существенными в плане взаимодействия с антителами. Полученные результаты соответствуют известным кристаллографическим данным по структуре молекулы P450cam. В участке 312-317 этого белка полипептидная цепь делает поворот, так что доступные для воды атомы боковых групп K313 и D316, атом кислорода остова белковой цепи K314, C a-атом G315 образуют компактный поверхностный кластер – вероятный участок связывания иммуноглобулиновой молекулы. Боковой радикал K314, удаленный от этого кластера, не участвует во взаимодействии с антителом . Таким образом, непрерывный эпитоп 311-318 цитохрома P450cam может быть признан конформационно-зависимым
Загрузить PDF:
Цитирование:
Мошковский С.А., Лебедев Д.Н., Колесанова Е.Ф., Арчаков А.И. (2001) Роль отдельных аминокислотных остатков иммунодоминантного непрерывного эпитопа цитохрома P450cam (CYP101) 312KKGDQ317 в распознавании специфическими антителами. Вопросы медицинской химии, 47(2), 248-278.
Мошковский С.А. и др. Роль отдельных аминокислотных остатков иммунодоминантного непрерывного эпитопа цитохрома P450cam (CYP101) 312KKGDQ317 в распознавании специфическими антителами // Вопросы медицинской химии. - 2001. - Т. 47. -N 2. - С. 248-278.
Мошковский С.А. и др., "Роль отдельных аминокислотных остатков иммунодоминантного непрерывного эпитопа цитохрома P450cam (CYP101) 312KKGDQ317 в распознавании специфическими антителами." Вопросы медицинской химии 47.2 (2001): 248-278.
Мошковский, С. А., Лебедев, Д. Н., Колесанова, Е. Ф., Арчаков, А. И. (2001). Роль отдельных аминокислотных остатков иммунодоминантного непрерывного эпитопа цитохрома P450cam (CYP101) 312KKGDQ317 в распознавании специфическими антителами. Вопросы медицинской химии, 47(2), 248-278.
Список литературы
Geysen H.M., Meloen R.H., Barteling S.J. (1984) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81, 3998- 4002. Scholar google search
Van Regenmortel M.H.V. (1999) In: Synthetic peptides as antigens. (Van Regenmortel, M.H.V. & Mueller, S., eds). Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular biology, vol. 28. Elsevier, pp. 1- 76. Scholar google search
Worthington J., Morgan K. (1994) In: Peptide Antigens. A Practical Approach (Wisdom, G.B., ed). Oxford University Press, Oxford - New York - Tokio, pp. 181- 217. Scholar google search
