ВОПРОСЫ МЕДИЦИНСКОЙ ХИМИИ (ISSN 0042-8809)

Времяразрешённый иммунофлуоресцентный анализ на ДНК и исследование содержания ДНК в сыворотке человека

   
Шевчук Н.А.1

1. Институт биоорганической химии Сибирского отделения РАН
Идентификатор PubMed: 11693032
Год: 2001  том: 47  выпуск: 4  страницы: 439-448
О внеклеточной ДНК крови известно, что она присутствует в очень низких концентрациях и её уровень способен значительно повышаться при некоторых злокачественных опухолях, системной красной волчанке и радиационном поражении. Нашей задачей была разработка количественного метода анализа для исследования уровня ДНК в сыворотке крови человека в норме и при патологии. Для этого были разработаны подходы к индукции антител класса G к нативной ДНК млекопитающих. Успешной оказалась иммунизация кроликов комплексом метилированного БСА с ДНК и в результате у одного из шести животных была получена антисыворотка против нативной ДНК млекопитающих (содержащая помимо иммуноглобулинов класса М антитела класса G). На основе анти-ДНК антител класса G был разработан времяразрешённый иммунофлуоресцентный сэндвич-анализ на ДНК. Чувствительность метода составляет 8 пкг/мл, а рабочий диапазон от 10 пкг до 1000 000 пкг/мл. При помощи времяразрешённого сэндвич-анализа были исследованы образцы сывороток здоровых доноров, больных вирусными гепатитами и аутоиммунным тиреоидитом. Концентрация ДНК в сыворотке здоровых доноров составляет 0,62 ± 0,49 нг/мл (среднее ± среднеквадратическое отклонение). У 19 больных вирусным гепатитом (В или С) и 14 пациентов с аутоиммунным тиреоидитом сывороточная концентрация ДНК значительно повышена и составляет соответственно 2,3 ± 6,6 и 105 ± 175 нг/мл. Высокий уровень внеклеточной ДНК в крови может являться одной из причин индукции ДНК-гидролизующих антител, которые часто встречаются при этих заболеваниях. Поскольку представленный сэндвич-метод способен определять следовые количества ДНК на фоне высоких концентраций белка в сыворотке крови, он может быть также рекомендован для анализа и других биологических жидкостей
Загрузить PDF:
Цитирование:

Шевчук, Н. А. (2001). Времяразрешённый иммунофлуоресцентный анализ на ДНК и исследование содержания ДНК в сыворотке человека. Вопросы медицинской химии, 47(4), 439-448.
Список литературы  
 2002 (том 48)
 2001 (том 47)
 2000 (том 46)
 1999 (том 45)
 1998 (том 44)
 1997 (том 43)
 1996 (том 42)
 1995 (том 41)
 1994 (том 40)
 1993 (том 39)
 1992 (том 38)
 1991 (том 37)
 1990 (том 36)
 1989 (том 35)
 1988 (том 34)
 1987 (том 33)
 1986 (том 32)
 1985 (том 31)