При определении эстеразной активности трипсина в сыворотке крови по методу Erlanger происходит завышение показателей вследствие помутнения инкубационной среды, не связанное с гидролизом субстрата. Предложенная В.А. Шатерниковым поправка, основанная на использовании двухволнового метода, полностью не устраняет этот побочный фактор.
Для просветления растворов предлагается останавливать реакцию погружением пробирок в лёд, с последующим центрифугированием исследуемых проб при 0° С в течение 15 минут при 25 000 g, что даёт возможность измерять истинный прирост оптической плотности за счёт гидролиза субстрата.
Представлены результаты измерения эстеразной активности трипсина в сыворотке крови и перитонеальном экссудате собак с острым экспериментальным панкреатитом. У интактных животных истинная эстеразная активность трипсина в сыворотке крови не выявлялась; через 3-4 часа после моделирования заболевания у двух из 7-ми особей она не превышала 3,6 мкмоль/(мин·л), а у остальных - отсутствовала.
При остром панкреатите у крыс эстеразная активность трипсина крови также была очень низкой (0,38±0,16 мкмоль/(мин·л)) и статистически не отличалась от показателей контрольных животных. Высказано сомнение в целесообразности применения этого метода для диагностики острого панкреатита, поскольку эстеразную активность проявляет только комплекс трипсин- a-2-макроглобулин, содержание которого в крови не превышает 10% от общего количества связанного с антипротеазами трипсина.
Эстеразная активность трипсина, обнаруживаемая в крови и перитонеальном экссудате, не свидетельствует о его протеолитической активности, что подтверждено данными эксперимента, полученными при введении в среду соевого ингибитора трипсина.
Загрузить PDF:
Цитирование:
Шабанов В.В., Милякова М.Н., Сарбаева Н.Н. (2003) Модификация метода определения эстеразной активности трипсина. Биомедицинская химия, 49(1), 63-69.
Шабанов В.В. и др. Модификация метода определения эстеразной активности трипсина // Биомедицинская химия. - 2003. - Т. 49. -N 1. - С. 63-69.
Шабанов В.В. и др., "Модификация метода определения эстеразной активности трипсина." Биомедицинская химия 49.1 (2003): 63-69.
Шабанов, В. В., Милякова, М. Н., Сарбаева, Н. Н. (2003). Модификация метода определения эстеразной активности трипсина. Биомедицинская химия, 49(1), 63-69.
Список литературы
Вашетко Р.В., Толстой А.Д., Курыгин А.А. и др. (2000) Острый панкреатит и травмы поджелудочной железы: руководство для врачей. СПб, Питер, 320 с. Scholar google search
Костюченко А.Л., Филин В.И. (2000) Неотложная панкреатология: справочник для врачей. СПб, Деан. Scholar google search
Отлыгин Ю.В. (1992) Особенности патогенеза, диагностики, клинического течения и лечения панкреатогенного шока. Дис... канд.наук. Москва, 251 л. Scholar google search
