Использование метода лантанидного флуоресцентного иммуноанализа для определения гормона тироксина в сухих пятнах крови

   
Жердева В.В.1 , Чудинов А.В.2, Савицкий А.П.1

1. Институт биохимии им. А.Н. Баха РАН
2. Институт молекулярной биологии им. В. А Энгельгардта, РАН
Раздел: Экспериментальные/клинические исследование
Идентификатор PubMed: 14569875
Год: 2003  том: 49  выпуск: 1  страницы: 70-79
Определение гормона тироксина (Т4) является подтверждающим тестом на врожденный гипотиреоз, который в 70% случаев протекает бессимптомно. Нами разработан метод иммунофлуоресцентного анализа тироксина для неонатального скрининга с использованием моноклональных антител и тироксина, меченного европием, в сухих пятнах крови для флуоресцентного иммуноанализа с временным разрешением (ФИАВР) с использованием импульсного спектрофлуорометра DELFIA Plate Fluorometer 1232 ("Wallac", Финляндия) и его последующих модификаций, которыми оборудованы региональные центры неонатального скрининга. Получены, охарактеризованы и стандартизированы препараты моноклональных антител: определены классы/подклассы иммуноглобулинов (IgG 2b, IgG 1), константы связывания (107 - 108 М-1), перекрестная реактивность с агентами, гомологичными по структуре с Т4 (0-2% перекреста). Отобраны наиболее устойчивые клоны с константой аффинности 108 М-1, позволяющие детектировать уровень концентрации общего тироксина в крови. Синтезированы конъюгаты хелата европия с тироксином. Оптимизирован состав буфера для анализа Т4, который включает салицилат натрия в концентрации 2 мг/мл и этилендиаминтетрауксусную кислоту в концентрации 2 мМ. Предел детекции тироксина в сухих пятнах крови составляет 10 нМ, при коэффициенте вариации не более 15 %, что позволяет диагностировать сниженный уровень общего тироксина. Точность анализа тироксина оценена с помощью набора сывороток для межлабораторного контроля качества Lipochek Immunoassay Plus Control KitTM ("BioRad", США). Полученные значения укладываются в доверительный интервал концентраций Т4, указанный для сывороток, что говорит о надежности разработанного метода.
Загрузить PDF:
Цитирование:

Жердева, В. В., Чудинов, А. В., Савицкий, А. П. (2003). Использование метода лантанидного флуоресцентного иммуноанализа для определения гормона тироксина в сухих пятнах крови. Биомедицинская химия, 49(1), 70-79.
Список литературы  
 2022 (том 68)
 2021 (том 67)
 2020 (том 66)
 2019 (том 65)
 2018 (том 64)
 2017 (том 63)
 2016 (том 62)
 2015 (том 61)
 2014 (том 60)
 2013 (том 59)
 2012 (том 58)
 2011 (том 57)
 2010 (том 56)
 2009 (том 55)
 2008 (том 54)
 2007 (том 53)
 2006 (том 52)
 2005 (том 51)
 2004 (том 50)
 2003 (том 49)