Матриксные металлопротеиназы (ММП) играют ключевую роль в развитии процессов инвазии и метастазирования при канцерогенезе. Цель работы - выяснение особенностей экспрессии ММП-2 и ММП-9 (желатиназ А и В), ММП мембранного типа - МТ1-ММП (активатора ММП-2) и тканевого ингибитора ММП - ТИМП-2 в иммортализованных (ИФ) и трансформированных фибробластах (ТФ). Работа проведена на эмбриональных фибробластах крысы, последовательно иммортализованных LT-геном вируса полиомы и трансформированных геном Е7 вируса папилломы человека - HPV16. Вирусы папиллом высокого риска (HPV16 и HPV18 типов) являются этиологическим фактором рака шейки матки. В качестве контроля использовали первичную культуру фибробластов (ПФ). Исследование ТФ и ИФ включало: определение коллагенолитической активности ММП по гидролизу специфического субстрата - радиоактивного коллагена IV типа; анализ спектра ММП методом зимографии; оценку экспрессии мРНК методом ОТ-ПЦР. Установлено, что: 1) коллагенолитическая активность ММП была увеличена только в ТФ, причем наиболее высокими эти показатели были в клетках с наиболее выраженными туморогенными свойствами; 2) исследование спектра ММП показало, что ММП-9 присутствует в основном в ТФ, в то время как ММП-2 обнаружена и в ИФ; 3) экспрессия мРНК ММП-9, МТ1-ММП и ТИМП-2 была увеличена во всех ТФ, в то время как экспрессия ММП-2 увеличивалась только в ТФ, которые прошли селекцию на животных; 4) как коллагенолитическая активность, так и экспрессия мРНК ММП-2 и ММП-9, а также эндогенных регуляторов активности (МТ1-ММП и ТИМП-2) в ИФ не изменялись по сравнению с ПФ. Полученные данные свидетельствуют об изменении соотношения фермент/активатор/ингибитор и существенном увеличении деструктивного потенциала ТФ. По-видимому, ММП-9 может служить маркером фибробластов, трансформированных геном Е7 HPV16 в культуре клеток.
Загрузить PDF:
Ключевые слова: желатиназы А и В, ММП-2 и ММП-9, ТИМП-2, иммортализация, трансформация, ген Е7 HPV-16
Цитирование:
Соловьева Н.И., Винокурова С.В., Рыжакова О.С., Гуреева Т.А., Цветкова И.В. (2009) Экспрессия желатиназ A и B и эндогенных регуляторов их активности в иммортализованных и трансформированных фибробластах. Биомедицинская химия, 55(4), 441-450.
Соловьева Н.И. и др. Экспрессия желатиназ A и B и эндогенных регуляторов их активности в иммортализованных и трансформированных фибробластах // Биомедицинская химия. - 2009. - Т. 55. -N 4. - С. 441-450.
Соловьева Н.И. и др., "Экспрессия желатиназ A и B и эндогенных регуляторов их активности в иммортализованных и трансформированных фибробластах." Биомедицинская химия 55.4 (2009): 441-450.
Соловьева, Н. И., Винокурова, С. В., Рыжакова, О. С., Гуреева, Т. А., Цветкова, И. В. (2009). Экспрессия желатиназ A и B и эндогенных регуляторов их активности в иммортализованных и трансформированных фибробластах. Биомедицинская химия, 55(4), 441-450.
Переводная версия в журнале «Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:10.1134/S1990750809030068
Список литературы
Nagase H., Visse R., Murphy G. (2006) Cardiovasc. Res., 69, 562-573. Scholar google search
Cauwe B., Van den Steen P.E., Opdenakker G. (2007) Crit. Rev. Biochem. Mol. Biol., 42, 113-185. Scholar google search
Dixit S.N., Granville R.V. (1991) in: Immunochemistry of the extracellular matrix, Methods (H. Furthmayr ed.) CRC Press, Florida, I, 61-74. Scholar google search
Cawston T.E., Murphy G. (1981) in: Methods in enzymology (L. Lorand ed.) Academic press., New York, 80, 711-722. Scholar google search
Murphy G., Grabbe T. (1995) in: Methods in enzymology (A.J. Barrett ed.) Academic press, San Diego, 248, 470-484. Scholar google search
Samoylova E.V., Shaikhaiev G.O., Petrov S.V., Kisseljova N.P., Kisseljov F.L. (1995) Int. J. Cancer, 61, 337-341. CrossRef Scholar google search
Shofuda K., Moriyama K., Nishihashi A., Higashi S., Mizushima H., Yasumitsu H., Miki K., Soto H., Seiki M., Miyazaki K. (1998) J. Biochem., 124, 462-470. Scholar google search
Strongin A.Y., Collier I., Bannikov G., Marmer B.L., Grant G.A., Goldberg G.I. (1995) J. Biol. Chem., 270, 5331-5338 . Scholar google search
