Предложен метод прямой регистрации активности CYP51b1 (стерол-14α-деметилазы) с использованием производных кумарина в качестве субстрата. Определение каталитической активности фермента с 7-аминокумарин-4-уксусной кислотой (АСАС) основано на регистрации увеличения флуоресценции (λexitation = 360 nm и λemission = 435 nm) при 30°С. Показано, что BMR (флавиновый домен бактериального цитохрома Р450ВМ-3) может служить донором электронов в модельной системе для определения активности CYP51b1. Разработанный метод отличается чувствительностью, точностью, простотой и может быть использован для скрининга ингибиторов стерол-14α-деметилазы.
Петушкова Н.А., Лисица А.В., Позднев В.Ф., Карузина И.И. (2010) Флуориметрический метод определения каталитической активности CYP51b1 (стерол-14α-деметилазы) с производными кумарина. Биомедицинская химия, 56(1), 132-137.
Петушкова Н.А. и др. Флуориметрический метод определения каталитической активности CYP51b1 (стерол-14α-деметилазы) с производными кумарина // Биомедицинская химия. - 2010. - Т. 56. -N 1. - С. 132-137.
Петушкова Н.А. и др., "Флуориметрический метод определения каталитической активности CYP51b1 (стерол-14α-деметилазы) с производными кумарина." Биомедицинская химия 56.1 (2010): 132-137.
Петушкова, Н. А., Лисица, А. В., Позднев, В. Ф., Карузина, И. И. (2010). Флуориметрический метод определения каталитической активности CYP51b1 (стерол-14α-деметилазы) с производными кумарина. Биомедицинская химия, 56(1), 132-137.
Переводная версия в журнале «Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:10.1134/S1990750810010130
Список литературы
Archakov A.I., Bachmanova G.I. (1990) Cytochrome P450 and Active Oxygen: Taylor and Francis, London. Scholar google search
