Предложен ВЭЖХ метод определения гомоцистеина и цистеина в плазме/сыворотке с УФ детекцией при 330 нм и разделением на колонке 150×4,6 мм с октадецилсиликагелем (С18) в изократическом режиме с использованием в качестве элюента ацетонитрил - 0,05 М цитратно-фосфатный буфер с рН 2,4 - изопропанол (15:85:1, v/v/v). Полное разделение цистеина, цистеамина (IS), глутатиона и гомоцистеина занимает менее 10 мин. Восстановление тиолов из дисульфидных связей осуществляли 1,4-дитиоэритритолом, дериватизацию - реагентом Эллмана [5,5'-дитиобис-(2-нитробензойная кислота)]. После этого плазму/сыворотку с дериватами тиолов очищали и концентрировали на картридже с 10 мг сверхсшитого полистирола (Purosep-200). Элюирование с картриджа производили как водно-органическим растворителем (без упаривания и концентрирования, но без разбавления), так и безводными растворителями (с упариванием и концентрированием). Простота, воспроизводимость в сочетании с высокой чистотой экстрактов и достаточной чувствительностью (0,4 нг для гомоцистеина, 2 нг для глутатиона и 0,2 нг для цистеина и цистеамина при соотношении сигнал/шум > 3), делают метод пригодным для рутинного клинического применения.
Дутов А.А., Никитин Д.А., Федотова А.А. (2010) Определение гомоцистеина и цистеинав плазме/сыворотке крови ВЭЖХ методом с УФ детекцией и твердофазной экстракцией на полимерном сорбенте. Биомедицинская химия, 56(5), 609-615.
Дутов А.А. и др. Определение гомоцистеина и цистеинав плазме/сыворотке крови ВЭЖХ методом с УФ детекцией и твердофазной экстракцией на полимерном сорбенте // Биомедицинская химия. - 2010. - Т. 56. -N 5. - С. 609-615.
Дутов А.А. и др., "Определение гомоцистеина и цистеинав плазме/сыворотке крови ВЭЖХ методом с УФ детекцией и твердофазной экстракцией на полимерном сорбенте." Биомедицинская химия 56.5 (2010): 609-615.
Дутов, А. А., Никитин, Д. А., Федотова, А. А. (2010). Определение гомоцистеина и цистеинав плазме/сыворотке крови ВЭЖХ методом с УФ детекцией и твердофазной экстракцией на полимерном сорбенте. Биомедицинская химия, 56(5), 609-615.
