Применение нового реагента Cu-FL для анализа стимуляции синтеза NO секретом слюнных клеток медицинской пиявки в культуре эндотелия человека (HUVEC) и кардиомиоцитов крысы

   
Баскова И.П.1 , Алексеева А.Ю.1, Костюк С.В.2 , Неверова М.Е.2 , Смирнова Т.Д.2 , Вейко Н.Н.2

1. Биологический факультет МГУ им. М.В. Ломоносова
2. Медико-генетический Научный Центр
Раздел: Экспериментальное/клиническое исследование
DOI: 10.18097/pbmc20125801065      Идентификатор PubMed: 22642153
Год: 2012  том: 58  выпуск: 1  страницы: 65-76
Впервые показана способность секрета слюнных клеток (ССК) медицинской пиявки продуцировать оксид азота в культуре эндотелия человека (HUVEC) и в кардиомиоцитах крысы (КМК) при непосредственном его определении с помощью нового NO-специфичного реагента - комплекса двухвалентной меди с производным флуоресцеина (Cu-FL). NO детектировали в клетках методом флуоресцентной микроскопии и определяли количественно в клетках и в культуральной жидкости методом флуоресценции. Стимулированная ССК интенсивность синтеза NO в клетках HUVEC, но не в КМК, такова, что оксид азота выходит в межклеточное пространство и это обеспечивает их дальнейшее распространение. Представлена локализация центров синтеза NO в клетках и показано, что увеличение количества NO при действии ССК на HUVEC и на КМК происходит в результате увеличения активности eNOS/nNOS, но не iNOS. В эндотелиальных клетках в присутствии ССК активируются процессы нитрозилирования, что проявляется в увеличении количества нитрит-ионов в среде культивирования по отношению к количеству NO. Поэтому важно, особенно в течение первого часа наблюдения за синтезом NO, использовать Cu-FL, но не реактив Грисса. NO-зависимый механизм действия ССК, возможно, является одним из факторов, обеспечивающих его положительное действие при гирудотерапии.
Загрузить PDF:
Ключевые слова: оксид азота, секрет слюнных клеток медицинской пиявки, NO-зонд Cu-FL, флуоресцентная микроскопия, трансмиссионная электронная микроскопия, реактив Грисса, NO-синтазы
Цитирование:

Баскова, И. П., Алексеева, А. Ю., Костюк, С. В., Неверова, М. Е., Смирнова, Т. Д., Вейко, Н. Н. (2012). Применение нового реагента Cu-FL для анализа стимуляции синтеза NO секретом слюнных клеток медицинской пиявки в культуре эндотелия человека (HUVEC) и кардиомиоцитов крысы. Биомедицинская химия, 58(1), 65-76.
Переводная версия в журнале
«Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:
10.1134/S1990750813010022
Список литературы  
 2019 (том 65)
 2018 (том 64)
 2017 (том 63)
 2016 (том 62)
 2015 (том 61)
 2014 (том 60)
 2013 (том 59)
 2012 (том 58)
 2011 (том 57)
 2010 (том 56)
 2009 (том 55)
 2008 (том 54)
 2007 (том 53)
 2006 (том 52)
 2005 (том 51)
 2004 (том 50)
 2003 (том 49)