Изменения физико-химических факторов, возникающие в процессе замораживания и низкотемпературного хранения биологических объектов, могут вызывать нарушения структуры белков. Методом Ds-Na-ПААГ электрофореза исследовали спонтанную и диамид-индуцируемую агрегацию белков сыворотки плацентарной крови (СПК), хранившейся при -20° и -196°С в течение 2 лет. Было установлено, что низкотемпературное хранение сыворотки не вызывало качественных и количественных изменений в распределении фракций белков, денатурированных в Ds-Na, в сравнении с образцами нативной незамороженной СПК. Применение b-меркаптоэтанола выявило, что белки СПК в ходе замораживания–оттаивания не формируют спонтанных агрегатов, ковалентно-сшитых посредством дисульфидных мостиков. Окисление сульфгидрильных групп аминокислотных остатков, индуцированное диамидом и сопровождаемое формированием высокомолекулярных агрегатов, оказалось достаточно эффективным способом для опосредованной оценки структурных изменений белковых макромолекул под влиянием низких температур. В образцах, подвергнутых низкотемпературным воздействиям, агрегируемость белков в присутствии 4 мМ диамида была существенно выше, чем в нативной СПК. Структурные изменения, происходящие в белках СПК под воздействием низких температур и обнаруживаемые по различной чувствительности к диамид–индуцированному формированию белковых агрегатов, не зависели от температуры (-20° и -196°С) и сроков хранения (2 года и 3 недели). Данные изменения отражают реакцию белков на процессы замораживания-оттаивания и могут быть следствием формирования кристаллов льда, которые образуются в незащищённых криопротекторами средах.
Фалько О.В., Землянских Н.Г., Липина О.В., Прокопюк О.С. (2013) Модификация белков сыворотки плацентарной крови под влиянием низких температур. Биомедицинская химия, 59(2), 219-234.
Фалько О.В. и др. Модификация белков сыворотки плацентарной крови под влиянием низких температур // Биомедицинская химия. - 2013. - Т. 59. -N 2. - С. 219-234.
Фалько О.В. и др., "Модификация белков сыворотки плацентарной крови под влиянием низких температур." Биомедицинская химия 59.2 (2013): 219-234.
Фалько, О. В., Землянских, Н. Г., Липина, О. В., Прокопюк, О. С. (2013). Модификация белков сыворотки плацентарной крови под влиянием низких температур. Биомедицинская химия, 59(2), 219-234.
Переводная версия в журнале «Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:10.1134/S1990750812020047
Список литературы
Wan G., Yu S., Liu J. (1998) J. Chung Hua Fu Chan Ko Tsa Chih., 33, 720-721. Scholar google search
Kyung-Chul Yoon, Hwan Heo, In-Yong Jeong, Yeoung Geol Park (2005) Kor. J. Ophthalmol., 19(3), 174-178. CrossRef Scholar google search
Sagawa N., Yura S., Itoh H., Kakui K., Takemura M., Nuamah M.A., Ogawa Y., Masuzaki H., Nakao K., Fujii S. (2002) J. Endocrine, 19(1), 65-71. CrossRef Scholar google search
Seifarth C.C., Miertschischk J., Hahn E.G., Hensen J. (2004) Clin. Chem. Lab. Med., 42(8), 927-932. CrossRef Scholar google search
Lev E.I., Hendler I., Siebner R., Tashma Z., Wiener M., Tur-Kaspa I. (1994-1995) Enzyme Protein, 48, 238-242. Scholar google search
Cray C., Rodriguez M., Zaias J., Altman N.H. (2009) J. Am. Assoc. Lab. Anim. Sci., 48, 202-204. Scholar google search
Muller F., Tyler J.W., Parish S.M., Johnson K.A., Krytenberg D.S., Wilson L.K. (1997) J. Am. Vet. Res., 58, 354-355. Scholar google search
Ito Y., Nakachi K., Imai K., Hashimoto S., Watanabe Y., Inaba Y., Tamakoshi A., Yoshimura T. (2005) J. Epidemal., Suppl. 1, 67-73. CrossRef Scholar google search
Бейли Н. (1963) Статистические методы в биологии. Мир, Москва. Scholar google search
Pieper R., Gatlin C.L., Makusky A.J., Russo P.S., Schatz C.R., Miller S.S., Su Q., McGrath A.M., Estock M.A., Parmar P.P., Zhao M., Huang S.T., Zhou J., Wang F., Esquer-Blasco R., Anderson N.L., Taylor J., Steiner S. (2003) Proteomics, 3, 1345-1364. CrossRef Scholar google search
