Целью нашей работы было привлечь внимание исследователей к проблеме контаминации препаратов экзосом. Мы изучали в просвечивающем электронном микроскопе JEM-1400 (“JEOL”, Япония) препараты экзосом, выделенные с помощью последовательных центрифугирований по принятым схемам из различных биологических жидкостей: плазмы и мочи здоровых и больных онкологическими заболеваниями людей, сыворотки крупного рогатого скота и культуральной жидкости (клетки линий MDCK, MDA-MB и MCF-7). Все препараты (более 200) содержали экзосомы (везикулы), идентифицированные методом иммунно-электронной микроскопии по связыванию с антителами к тетраспанинам CD63 или CD9. Кроме экзосом, во всех исследованных препаратах присутствовали контаминирующие структуры низкой электронной плотности, не имеющие ограничивающей мембраны и, соответственно, не являющиеся экзосомами (“не-везикулы”). Отмечены два основных типа “не-везикул”: имеющие размер 20-40 нм и составляющие 10-40% всех структур препаратов экзосом, и имеющие размер 40-100 нм. Морфология “не-везикул” позволяет отнести их к липопротеинам промежуточной и низкой плотности (20-40 нм) и очень низкой плотности (40-100 нм). Последние идентичны по размеру экзосомам. Наибольший уровень контаминации отмечен в препаратах экзосом крови. Полученные данные указывают на необходимость контролировать состав препаратов экзосом с помощью электронной микроскопии и учитывать присутствие контаминирующих структур при анализе и интерпретации результатов исследования.
Григорьева А.Е. и др. Контаминация препаратов экзосом, выделенных из биологических жидкостей // Биомедицинская химия. - 2017. - Т. 63. -N 1. - С. 91-96.
Григорьева А.Е. и др., "Контаминация препаратов экзосом, выделенных из биологических жидкостей." Биомедицинская химия 63.1 (2017): 91-96.
Григорьева, А. Е., Дырхеева, Н. С., Брызгунова, О. Е., Тамкович, С. Н., Челобанов, Б. П., Рябчикова, Е. И. (2017). Контаминация препаратов экзосом, выделенных из биологических жидкостей. Биомедицинская химия, 63(1), 91-96.
Переводная версия в журнале «Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:10.1134/S1990750817030040
Список литературы
Yanez-Mo M., Siljander P.R., Andreu Z., Zavec A.B., Borras F.E., Buzas E.I., Buzas K., Casal E., Cappello F., Carvalho J. et al. (2015) J. Extracell. Vesicles, 4, 27066. CrossRef Scholar google search
Torrano V., Royo F., Peinado H., Loizaga-Iriarte A., Unda M., Falcon-Perez J.M., Carracedo A. (2016) Curr. Opin. Pharmacol., 29, 47-53. CrossRef Scholar google search
Ciardiello C., Cavallini L., Spinelli C., Yang J., Reis-Sobreiro M., de Candia P., Minciacchi V.R., Di Vizio D. (2016) Int. J. Mol. Sci., 17(2). CrossRef Scholar google search
Johnstone R.M., Adam M., Hammond J.R., Orr L., Turbide C. (1987) J. Biol. Chem., 262(19), 9412-9420. Scholar google search
Hong C.S., Funk S., Muller L., Boyiadzis M., Whiteside T.L. (2016) J. Extracell. Vesicles, 5, 29289. CrossRef Scholar google search
Nakai W., Yoshida T., Diez D., Miyatake Y., Nishibu T., Imawaka N., Naruse K., Sadamura Y., Hanayama R. (2016) Sci. Rep., 6, 33935. CrossRef Scholar google search
Oliveira-Rodriguez M., Lopez-Cobo S., Reyburn H.T., Costa-Garcia A., Lopez-Martin S., Yanez-Mo M., Cernuda-Morollon E., Paschen A., Vales-Gomez M., Blanco-Lopez M.C. (2016) J. Extracell. Vesicles, 5, 31803. CrossRef Scholar google search
Alvarez M.L., Khosroheidari M., Kanchi Ravi R., DiStefano J.K. (2012) Kidney Int., 82(9), 1024-1032. CrossRef Scholar google search
Lotvall J., Hill A.F., Hochberg F., Buzas E.I., Di Vizio D., Gardiner C., Gho Y.S., Kurochkin I.V., Mathivanan S., Quesenberry P., Sahoo S., Tahara H., Wauben M.H., Witwer K.W., Thery C. (2014) J. Extracell. Vesicles, 3, 26913. CrossRef Scholar google search
helke G.V., Lasser C., Gho Y.S., Lotvall J. (2014) J. Extracell. Vesicles, 3, 24783. Scholar google search
Yuana Y., Levels J., Grootemaat A., Sturk A., Nieuwland R. (2014) J. Extracell. Vesicles, 3, 23262. CrossRef Scholar google search
Sodar B.W., Kittel A., Paloczi K., Vukman K.V., Osteikoetxea X., Szabo-Taylor K., Nemeth A., Sperlagh B., Baranyai T., Giricz Z. et al. (2016) Sci. Rep., 6, 24316. CrossRef Scholar google search
Dashty M., Motazacker M.M., Levels J., de Vries M., Mahmoudi M., Peppelenbosch M.P., Rezaee F. (2014) Thromb. Haemost., 111(3), 518-530. CrossRef Scholar google search
Monguio-Tortajada M., Roura S., Galvez-Monton C., Pujal J.M., Aran G., Sanjurjo L., Franquesa M., Sarrias M.R., Bayes-Genis A., Borras F.E. (2017) Theranostics, 7(2), 270-284. CrossRef Scholar google search
