Ферментативная и бактерицидная активность мономерной и димерной форм миелопероксидазы

   
Вахрушева Т.В.1 , Соколов А.В.2, Костевич В.А.2, Васильев В.Б.3, Панасенко О.М.4

1. Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины, Москва, Россия
2. Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины, Москва, Россия; Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, Россия
3. Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, Россия; Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия
4. Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины, Москва, Россия; Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия
Раздел: Экспериментальное исследование
DOI: 10.18097/PBMC20186402175      Идентификатор PubMed: 29723147
Год: 2018  том: 64  выпуск: 2  страницы: 175-182
Проведено сравнительное исследование ферментативной и бактерицидной активности зрелой, димерной миелопероксидазы (МПО) и её мономерной формы. Димерную МПО выделяли из клеток линии HL-60. В качестве мономерной формы использовали геми-МПО, которую получали из димерной МПО восстановлением дисульфидной связи, соединяющей протомеры в димер. Оценивали оба вида ферментативной активности, свойственных МПО (пероксидазную и галогенирующую), каждую из которых измеряли двумя методами. Бактерицидную активность системы МПО/Н2О2/Cl- тестировали, используя лабораторный штамм Escherichia coli DH5a. Не было выявлено разницы в ферментативной и бактерицидной активности между димерной МПО и геми-МПО. Обе формы фермента не отличались между собой и по устойчивости к HOCl – основному продукту катализируемых МПО реакций. HOCl вызывала дозо-зависимое уменьшение пероксидазной и хлорирующей активности, и это уменьшение происходило одинаковым образом в образцах димерной МПО и геми-МПО. При концентрации димерной МПО и геми-МПО, уравненной по гему, отмечен несколько больший бактерицидный эффект в случае системы геми-МПО/Н2О2/Cl- по сравнению с системой димерная МПО/Н2О2/Cl-. Это, скорее всего, обусловлено увеличением вероятности контакта фермента с поверхностью бактерий благодаря тому, что при равной концентрации по гему количество молекул геми-МПО в два раза больше количества молекул димерной МПО. Методом Вестерн-блоттинга с использованием антител против МПО впервые показано, что HOCl вызывает расщепление димерной молекулы на мономерные субъединицы, по-видимому, в результате окисления дисульфидной связи между ними. Это позволяет предположить, что появление в крови МПО, соответствующей по массе мономеру, связано с повреждением димерной МПО активными формами галогенов, особенно при их избыточной продукции, создающей окислительный/галогенирующий стресс при воспалительных заболеваниях.
Загрузить PDF:
Ключевые слова: миелопероксидаза, геми-миелопероксидаза, хлорирующая активность, пероксидазная активность, бактерицидная миелопероксидазная система, окислительный/галогенирующий стресс
Цитирование:

Вахрушева, Т. В., Соколов, А. В., Костевич, В. А., Васильев, В. Б., Панасенко, О. М. (2018). Ферментативная и бактерицидная активность мономерной и димерной форм миелопероксидазы. Биомедицинская химия, 64(2), 175-182.
Список литературы  
 2020 (том 66)
 2019 (том 65)
 2018 (том 64)
 2017 (том 63)
 2016 (том 62)
 2015 (том 61)
 2014 (том 60)
 2013 (том 59)
 2012 (том 58)
 2011 (том 57)
 2010 (том 56)
 2009 (том 55)
 2008 (том 54)
 2007 (том 53)
 2006 (том 52)
 2005 (том 51)
 2004 (том 50)
 2003 (том 49)