1. НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия; Институт молекулярной медицины, Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова, Москва, Россия 2. Факультет биоинженерии и биоинформатики МГУ имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия 3. НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия 4. НИИ физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского МГУ имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия; Факультет биоинженерии и биоинформатики МГУ имени М.В. Ломоносова, Москва, Россия
Предложена совокупность приемов для быстрого и простого получения поликлональных антител к целевому антигену – альфа-синуклеину. Для очистки специфических поликлональных антител кролика против рекомбинантного альфа-синуклеина человека, наработанных в результате подкожной иммунизации с полным адъювантом Фрейнда, были использованы два метода. Показано, что очистка на CNBr-активированной сефарозе с иммобилизованным альфа-синуклеином приводит к получению препарата антител, содержащего в качестве примеси обогащенный гистидиновыми остатками гликопротеин крови кролика (histidine-rich glycoprotein). Двухстадийная очистка специфических антител на сефарозе с иммобилизованным белком G, а затем на колонке с иммобилизованным альфа-синуклеином позволяет избавиться от примесного белка и получить гомогенный препарат антител. Полученные антитела узнают различные конформации альфа-синуклеина и могут быть использованы для всех видов иммунного анализа, включая иммуноцитохимический.
Баринова К.В., Мельникова А.К., Шмальгаузен Е.В., Муронец В.И. (2018) Рациональный подход к получению высокоспецифичных поликлональных антител против рекомбинантного альфа-синуклеина. Биомедицинская химия, 64(3), 276-282.
Баринова К.В. и др. Рациональный подход к получению высокоспецифичных поликлональных антител против рекомбинантного альфа-синуклеина // Биомедицинская химия. - 2018. - Т. 64. -N 3. - С. 276-282.
Баринова К.В. и др., "Рациональный подход к получению высокоспецифичных поликлональных антител против рекомбинантного альфа-синуклеина." Биомедицинская химия 64.3 (2018): 276-282.
Баринова, К. В., Мельникова, А. К., Шмальгаузен, Е. В., Муронец, В. И. (2018). Рациональный подход к получению высокоспецифичных поликлональных антител против рекомбинантного альфа-синуклеина. Биомедицинская химия, 64(3), 276-282.
Переводная версия в журнале «Biomedical Chemistry (Moscow) Supplement Series B»:10.1134/S1990750818040029
Список литературы
Navarro-Yepes J., Anandhan A., Bradley E., Bohovych I., Yarabe B., de Jong A., Ovaa H., Zhou Y., Khalimonchuk O., Quintanilla-Vega B., Franco R. (2016) Mol. Neurobiol., 53(8), 5229-5251. CrossRef Scholar google search
Xiong Y., Neifert S., Karuppagounder S.S., Stankowski J.N., Lee B.D., Grima J.C., Chen G., Ko H.S., Lee Y., Swing D., Tessarollo L., Dawson T.M., Dawson V.L. (2017) Eneuro, 4(2), ENEURO.0004-17.2017. CrossRef Scholar google search
Beatman E.L., Massey A., Shives K.D., Burrack K.S., Chamanian M., Morrison T.E., Beckham J.D. (2016) J. Virol., 90(6), 2767-2782. CrossRef Scholar google search
Giasson B.I., Jakes R., Goedert M., Duda J.E., Leight S., Trojanowski J.Q., Lee V.M. (2000) J. Neurosci. Res., 59(4), 528-533. CrossRef Scholar google search